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安捷倫液相色譜儀的操作規(guī)范

更新時間:2019-08-06點擊次數(shù):1030

安捷倫液相色譜儀的規(guī)范操作
 

  1. 目的:明確安捷倫液相色譜儀的規(guī)范操作,確保數(shù)據(jù)的準確性。
 

  2. 范圍:適用于安捷倫液相色譜儀。
 

  3. 職責:檢驗人員對此負責。
 

  4. 操作規(guī)程:
 

  4.1 系統(tǒng)組成
 

  本系統(tǒng)由1個溶劑二元輸送泵(分主/A泵和副/B泵)、手動進樣閥、柱溫箱、檢測器、化學工作站和電腦等組成。
 

  4.2 安捷倫液相色譜儀準備
 

  4.2.1使用前應根據(jù)待檢樣品的檢驗方法準備所需的流動相,用合適的0.45μm濾膜過濾,超聲脫氣20min。
 

  4.2.2 根據(jù)待檢樣品的需要更換合適的色譜柱(柱進出口位置應與流動相流向一致)和定量環(huán)。
 

  4.2.3 配制樣品和標準溶液(也可在平衡系統(tǒng)時配制),用合適的0.45μm濾膜過濾。
 

  4.2.4 檢查儀器各部件的電源線、數(shù)據(jù)線和輸液管道是否連接正常
 

  4.1 將待測樣品按要求前處理,準備HPLC 所需流動相,檢查線路是否連接完好,廢液瓶是否夠用等。
 

  4.3安捷倫液相色譜儀開機:
 

  4.3.1 打開計算機,進入中文Windows XP畫面,并運行CAG Bootp Server程序。
 

  4.3.2 打開 1200 LC 各模塊電源。
 

  4.3.3 待各模塊自檢完成后,雙擊[Instrument 1 Online]圖標,化學工作站自動與1200LC
 

  通訊,進入的工作站畫面如下所示。
 

  4.3.4 從[視圖]菜單中選擇[方法和運行控制]畫面, 點擊[視圖]菜單中的[顯示頂部 工具欄], [ 顯示狀態(tài)工具欄],[系統(tǒng)視圖],[樣品視圖],使其命令前有[√]標志,來調用所需的界面。
 

  4.3.5 把流動相放入溶劑瓶中。
 

  4.3.6 打開沖洗閥。
 

  4.3.7 點擊[泵]圖標,點擊[設置泵…]選項,進入泵編輯畫面。
 

  4.3.8 設流速:5ml/min,點擊[確定]。
 

  4.3.9 點擊[泵] 圖標,點擊[控制…]選項,選中[啟動],點擊[確定] ,則系統(tǒng)開始沖洗,直到管線內(由溶劑瓶到泵入口)無氣泡為止,切換通道繼續(xù)沖洗,直到所有要用通道無氣泡為止。
 

  4.3.10 點擊[泵] 圖標,點擊[控制…]選項,選中[關閉],點擊[確定]關泵, 關閉沖洗閥。
 

  4.3.11 點擊[泵]圖標,點擊 [設置泵…選項],設流速:1.0ml/min。
 

  4.3.12 點擊泵下面的瓶圖標,如下圖所示(以單元泵為例),輸入溶劑的實際體積和瓶體積。 也可輸入停泵的體積,點擊[確定]。
 

  4.4 安捷倫液相色譜儀的數(shù)據(jù)采集方法編輯
 

  4.4.1開始編輯完整方法:從[方法]菜單中選擇[編輯完整方法…] 項,如下圖所示選中除[數(shù)據(jù)分析 ]外的三項,點擊[確定],進入下一畫面。 4.4.2方法信息
 

  4.4.2.1在[方法注釋]中加入方法的信息(如:測試方法)。 4.4.2.2 點擊 [確定], 進入下一畫面。 4.4.3 泵參數(shù)設定
 

  4.4.3.1 在[流速]處輸入流量,如1ml/min,在[溶劑 B]處輸入80.0,(A=100-B) ,也可[插入 ]一行[時間表] ,編輯梯度。在[壓力限]處輸入柱子的大耐高壓,以保護柱子。
 

  4.4.3.2 點擊[確定],進入下一畫面。
 

  4.4.4 柱溫箱參數(shù)設定
 

  4.4.4.1 在[溫度]下面的方框內輸入所需溫度,如:40度。并選中它,點擊[更多>>] 鍵,如圖所示,選中[與左側相同],使柱溫箱的溫度左右一致。
 

  4.4.4.2 點擊[確定],進入下一畫面。
 

  4.4.5 檢測器參數(shù)設定:檢測波長:一般選擇大吸收處的波長。樣品帶寬:一般選擇大吸收值一半處的整個寬度。參比波長:一般選擇在靠近樣品信號的無吸收或低吸收區(qū)域 。參比帶寬:少要與樣品信號的帶寬相等,許多情況下用100nm作為缺省值。同時可以輸入采集光譜方式,步長,范圍,閾值。選中所用的燈。
 

  4.4.6 在[ 運行時選項表 ]中選中[ 數(shù)據(jù)采集],點擊[確定]。
 

  4.4.7 點擊[方法]菜單,選中[方法另存為…],輸入一方法名,如[測試],點擊[確定]。
 

  4.4.8 從菜單 [視圖]中選中[在線信號],選中[信號窗口1],然后點擊[改變…] 鈕,將所要繪圖的信號移到右邊的框中,點擊[確定]。(如同時檢測二個信號,則重復10,選中[信號窗口2]。
 

  單擊[改變]鍵,即可彈出右側的[編輯信號圖譜]窗口,進而選擇所需的譜圖信號。 4.4.9 從[運行控制]菜單中選擇[樣品信息]選項,如下圖所示,輸入操作者名稱,如[安裝工程師];在[數(shù)據(jù)文件 ]中選擇[手動]或[前綴/計數(shù)器]。區(qū)別: 手動--每次做樣之前必須給出新名字,否則儀器會將上次的數(shù)據(jù)覆蓋掉。 Pr—在前綴/計數(shù)器----[前綴]框中輸入前綴,在[計數(shù)器]框中輸入計數(shù)器的起始位,儀器會自動命名,如vwd數(shù)據(jù)0001,vwd數(shù)據(jù)0002……。
 

  4.4.10 點擊[確定] ,從[儀器] 菜單選擇[系統(tǒng)開啟]。
 

  4.4.11 等儀器準備好,基線平穩(wěn),用試樣溶液清洗注射器,并排除氣泡后抽取適量。
 

  4.5 安捷倫液相色譜儀的數(shù)據(jù)分析方法編輯:
 

  4.5.1 從[視圖]菜單中,點擊[數(shù)據(jù)分析]進入數(shù)據(jù)分析畫面。
 

  4.5.2 從[文件]菜單選擇[調用信號],選中您的數(shù)據(jù)文件名,如下圖所示。點擊[ 確定],則數(shù)據(jù)被調出。
 

  4.5.3做譜圖優(yōu)化:從[圖形]菜單中選擇[信號選項],如下圖所示。從[范圍] 中選擇[滿量程] 或[自動量程] 及合適的時間范圍或選擇[自定義量程] 調整。反復進行,直到圖的比例合適為止。點擊[ 確定]。
 

  4.6安捷倫液相色譜儀積分:
 

  4.6.1 從[積分]菜單中選擇[積分事件]選項,如下圖所示。選擇合適的[斜率靈敏度]
 

  ,[峰寬],[小峰面積],[小峰高]。

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